PCR反应体系的成分包括:①模板DNA;②寡核苷酸引物;③dNTP;④反应缓冲液;⑤Taq DNA聚合酶。
杭州亲子鉴定模板DNA有机溶剂提取法、Chelerl00法或其他DNA提取方法均可用于制备楼板DNA。因PCR技术对楼板要求不高,目前常规采用Chelex -100据取基因组DNA。Chelex-i00是一种螯合树脂,由苯乙烯和二乙烯苯的共壤体组成,含有成对的亚氨基二乙酸盐离子,能够螯合二价金屈离子,抑制DNA酶,保护DNA分子。Chelex-100提取法比较简单,用5%Chelerl00溶液悬浮检材细胞,杭州亲子鉴定根据需要加入蛋白i酣K,经56C孵化和IOooC加温,在低洛条件下破坏细胞膜和核膜·释放出DNA。离心后的上清液即可作为PCR反应的棋板DNA液。
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